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Criopreservação celular: o que é e como funciona?

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Criopreservação celular é o nome da técnica que tem como objetivo preservar materiais biológicos para uso no futuro. O congelamento a baixíssimas temperaturas permite sua interrupção metabólica.

O armazenamento de células pode ser fonte de pesquisa no momento posterior, além de ter uso na biologia e medicina. A aplicação mais conhecida é para reprodução humana, com congelamento de óvulos, espermatozoides e embriões.

Quer saber mais sobre a criopreservação celular? Então, continue a leitura, entenda seu funcionamento e conheça o produto que dispensa o nitrogênio líquido no congelamento.

biossegurança em laboratórios

O que é criopreservação celular?

O congelamento celular é um processo que preserva células e tecidos pelo período de tempo necessário. O método mais conhecido é feito com uso de nitrogênio líquido, que possui ponto de ebulição em -196ºC.

Diferentemente do resfriamento, a criopreservação congela as células. Ao invés de apenas reduzir a atividade metabólica, ele cessa até que retorne a uso.

Qual a finalidade da criopreservação celular?

O congelamento de células tem a finalidade de auxiliar processos que não vão ser feitos no momento. Confira os principais usos da criopreservação!

Reprodução humana assistida

Para reprodução humana, gametas e embriões são congelados para quem quer engravidar no futuro. O processo de fertilização in vitro é usado por pessoas que não podem ter filhos naturalmente. 

As células também podem ser preservadas por quem vai passar por um processo que possa deixar os embriões inférteis ou por quem vai fazer vasectomia. O congelamento é uma possibilidade para o planejamento familiar.

Células tronco

A criopreservação de células tronco do cordão umbilical é fundamental para uso em tratamento de diversos tipos de doenças. O material se diferencia por conta da sua capacidade de regeneração e diferenciação, reparando outros tecidos do corpo humano.

Pessoa com luva azul segurando meio de cultura para realização de criopreservação celular.
A criopreservação é uma técnica baseada num uso futuro de materiais armazenados.

Criogenia

A criogenia é a preservação de corpos humanos (ou de parte, como cérebros). A ideia é que a medicina avance a ponto de poder “ressuscitar” os falecidos em algum momento, no futuro. Por isso, estão congelados em nitrogênio líquido, em temperaturas baixíssimas.

Criopreservação vegetal

Outra finalidade da técnica é o congelamento de células vegetais, com objetivo de regenerar plantas em qualquer época, sem que haja variações genéticas no material. O documento da Embrapa explica com detalhes a execução e os métodos utilizados.

Como funciona a criopreservação celular?

O congelamento de células começa pela coleta do material, seja qual for sua origem. Depois, ele passa por um processo de proteção, com adição de agentes crioprotetores. 

Existem dois tipos de substâncias protetoras: penetrantes e não penetrantes. O uso vai variar de acordo com o material.

  • Penetrantes (ou permeáveis): evitam a formação interna de cristais de gelo. Alguns meios de congelamento celular são o glicerol e o dimetilsulfóxido (DMSO). 
  • Não penetrantes (ou não permeáveis): retiram a água na parte de fora da célula. Eles são utilizados junto com o intracelular para evitar a desidratação por osmose.

Na sequência, é realizado o congelamento com a inserção do material no ultrafreezer. O ponto principal aqui é a velocidade em que a temperatura cai. Se for muito lenta, ela pode desidratar. Se for rápida, há possibilidade de criação de cristais e lesões na célula.

Por isso, a criopreservação com uso de nitrogênio precisa de uma descida de temperatura gradual e contínua até que chegue no patamar correto.

Pessoa segurando substância com pinça  para criopreservação celular.
O congelamento auxilia na manutenção das características originais de culturas celulares.

Existe meio de cultura de congelamento celular?

Sim! Existe meio de cultura específico para criopreservação, para além dos agentes crioprotetores. Uma das maiores dificuldades do congelamento é o controle da temperatura no ultrafreezer para evitar a morte celular. Mas para contornar esse desafio, existe o Bambanker™. Conheça melhor!

Bambanker™, da Nippon Genetics

O Bambanker™, produto desenvolvido pela Nippon Genetics, promove o congelamento rápido de células sem a necessidade da variação de temperatura gradual e nem de passagem no nitrogênio líquido. 

Desta maneira, o processo de criopreservação é facilitado pelo fato de não realizar congelamento programado ou sequencial. 

Vale destacar que o Bambanker™ não contém soro. Isso significa que o material não corre risco de contaminação, pois quando há, existe a possibilidade de flutuação nas taxas de recuperação, e indefinição da composição. 

Além disso, promove a reprodutibilidade de experimentos, uma vez que os produtos com soro podem ter uma variação, dependendo do lote.

Bambanker™, meio de congelamento para criopreservação celular.
O Bambankeré a solução para quem solucionar problemas de temperatura na criopreservação.

Como o Bambanker™ funciona?

O meio de cultura facilita o processo por não demandar um ultrafreezer adicional, além de evitar protocolos de congelamento demorados e complicados. 

Confira o passo a passo do funcionamento do Bambanker™:

  1. Coleta de células através da centrifugação.
  2. Aspiração de meio de cultura.
  3. Células adicionadas ao Bambanker™.
  4. Transferência para frasco criogênico.
  5. Armazenamento em -80ºC (a temperatura pode chegar a -196ºC).

Comparação de métodos

A Nippon Genetics realizou um estudo comparativo em que utilizou o Bambanker™ e outros métodos convencionais do mercado, para verificar a performance no congelamento e descongelamento.

Nas culturas de células em suspensão, verificou-se que a concentração foi maior com a utilização do Bambanker™ quando comparado aos outros métodos com o passar dos dias.

Gráfico comparativo entre métodos sobre concentração na criopreservação celular, com uso de Bambanker.
Comparativo entre métodos sobre concentração de células com o passar dos dias. Fonte: Reprodução/Application Notes – Nippon Genetics.

Na comparação com células aderentes, o número de células após sete dias de conservação foi cerca de duas vezes maior quando usado o Bambanker™. 

Gráfico comparativo entre número de células após sete dias na criopreservação celular, com uso de Bambanker.
Gráfico comparativo entre o número de células após sete dias. Fonte: Reprodução/Application Notes – Nippon Genetics.

Além disso, a taxa de recuperação imediata após o descongelamento foi de 32%, enquanto o meio de uso comercial foi de 39%. Porém, há melhoria na proliferação das quatro linhagens celulares com uso de Bambanker™.

Quer conferir as notas de aplicações com toda metodologia aplicada na comparação do Bambanker™ aos outros produtos? Então, clique aqui e acesse.

A criopreservação, certamente, é uma técnica que já evoluiu de alguns anos para cá e tem a tendência de aprimoramento. A forma como os materiais são preservados é fundamental para realização de pesquisas e seu uso biológico.

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Criopreservação celular - banner Bambanker.

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